纖維素酶熒光探針的制備及應(yīng)用

摘要： 表征酶與底物有效吸附是認(rèn)識(shí)纖維素酶促水解反應(yīng)過(guò)程、揭示預(yù)處理作用機(jī)制的重要手段之一。成功構(gòu)建了纖維素外切酶(Cel7A)、纖維素內(nèi)切酶(Cel5A)和葡萄糖苷酶(BglⅠ)熒光探針，優(yōu)化吸附條件，并考察其對(duì)細(xì)胞壁的吸附。結(jié)果表明，Cel7A、Cel5A、BglⅠ基因N端分別連接至熒光蛋白基因mCherry、eGFP、eBFP C端，依次連入pPICZα載體，成功在畢赤酵母(X3...