貓TNF-α蛋白的原核表達(dá)及阻斷活性單克隆抗體的制備

摘要： 為制備針對貓TNF-α的具有阻斷活性的單克隆抗體，本研究基于可溶性貓TNF-α(sTNFα)基因成功構(gòu)建、表達(dá)及純化了重組質(zhì)粒pET-28a-sTNFα,并進(jìn)一步對重組蛋白誘導(dǎo)表達(dá)的條件進(jìn)行摸索和優(yōu)化，鑒定其生物活性；其次將貓TNF-α重組蛋白作為免疫原進(jìn)行小鼠免疫、細(xì)胞融合、阻斷活性雜交瘤細(xì)胞的篩選和腹水制備，并對獲得的單克隆抗體進(jìn)行鑒定。結(jié)果顯示，成功構(gòu)建了pET-28a-...