基于CRISPR/Cas9系統(tǒng)構(gòu)建裸鼴鼠HIF-1α基因敲除質(zhì)粒及其功能驗(yàn)證
中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào)
頁(yè)數(shù): 8 2024-02-11
摘要: 目的 利用簇狀規(guī)則間隔回文重復(fù)序列(CRISPR)/Cas9基因編輯系統(tǒng)構(gòu)建質(zhì)粒并敲除裸鼴鼠皮膚成纖維(NMR skin fibroblasts, NSF)細(xì)胞HIF-1α基因,為研究裸鼴鼠的耐低氧機(jī)制及缺氧相關(guān)疾病的發(fā)生發(fā)展機(jī)制提供體外細(xì)胞模型。方法 針對(duì)裸鼴鼠HIF-1α基因的1~4號(hào)外顯子區(qū)域設(shè)計(jì)4對(duì)sgRNA序列,并成功構(gòu)建表達(dá)質(zhì)粒。篩選得到最優(yōu)sgRNA后,轉(zhuǎn)染HEK... (共8頁(yè))