組織蛋白酶B通過(guò)TLR4非依賴(lài)途徑調(diào)控小鼠肝臟Kupffer細(xì)胞內(nèi)炎癥的激活

摘要： 目的研究組織蛋白酶B在LPS引發(fā)小鼠膿毒血癥中的作用。方法動(dòng)物生存實(shí)驗(yàn)觀察:采用腹腔注射致死劑量LPS(54 mg/kg)法,WT小鼠隨機(jī)分為3組,TLR4-/-小鼠隨機(jī)分為3組,兩種小鼠的各組均依次分為生理鹽水對(duì)照組、致死劑量組(LPS)及組織蛋白酶B抑制劑—CA-074預(yù)處理組(CA-074+LPS),觀察小鼠生存時(shí)間及生存率;膿毒血癥實(shí)驗(yàn)采:用大劑量LPS(20 mg/kg)腹腔注射法,其余處理及分組同前,各組小鼠造模結(jié)束后:(1)肝臟HE染色檢測(cè)肝臟病理變化;(2)檢測(cè)肝臟Kupffer細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)組織蛋白酶B的蛋白水平及活性;(3)檢測(cè)血清中IL-1α、IL-1β、TNF-α、IL-18等炎癥因子水平。結(jié)果經(jīng)致死量LPS打擊后,TLR4-/-小鼠生存時(shí)間延長(zhǎng)至84 h,明顯長(zhǎng)于WT小鼠,但仍無(wú)法完全抵抗致死量LPS的打擊,CA-074預(yù)處理可分別延長(zhǎng)WT和TLR4-/-小鼠的生存時(shí)間至60和132 h。大劑量LPS刺激后,WT及TLR4-/-小鼠肝細(xì)胞變性壞死明顯,Kupffer細(xì)胞胞質(zhì)中組織蛋白酶B蛋白水平無(wú)明顯變化,但其在胞質(zhì)的活性顯著增加(P?0.05);血清中IL-1α、IL-1β、TNF-α以及IL-18等炎癥因子水平增高(P?0.05);各CA-074預(yù)處理組,肝細(xì)胞壞死減輕,Kupffer細(xì)胞中組織蛋白酶B蛋白水平無(wú)明顯變化,胞質(zhì)內(nèi)活性明顯降低(P?0.05);血清中IL-1α、IL-1β、TNF-α以及IL-18等炎癥因子水平明顯低于單純大劑量LPS刺激組(P?0.05)。結(jié)論在大劑量LPS誘導(dǎo)的膿毒血癥中,存在非依賴(lài)TLR4受體的炎癥通路的激活過(guò)程,組織蛋白酶B在這個(gè)過(guò)程中具有重要作用。 （共7頁(yè)）