縱觀歷史,幾乎沒有哪一門科學(xué)技術(shù)像流式細(xì)胞術(shù)這樣凝結(jié)了眾多不同學(xué)術(shù)背景、不同科研領(lǐng)域科學(xué)家的心血。從流式細(xì)胞術(shù)的發(fā)明、改進(jìn)和革新,到今天在各個領(lǐng)域應(yīng)用的拓展,每一步都是諸如生物學(xué)、生物技術(shù)、計(jì)算機(jī)科學(xué)、流體...[繼續(xù)閱讀]

    FCM的結(jié)構(gòu)一般分為5部分:①流動室及液流驅(qū)動系統(tǒng);②激光光源及光束成形系統(tǒng);③光學(xué)系統(tǒng);④信號檢測、存貯、顯示、分析系統(tǒng);⑤細(xì)胞分選系統(tǒng)。流式細(xì)胞儀的結(jié)構(gòu)見圖1-2-4。圖1-2-4流式細(xì)胞儀的光路結(jié)構(gòu)圖(一)流動室與液流驅(qū)動系...[繼續(xù)閱讀]

    (一)熒光測量靈敏度靈敏度的高低是衡量儀器檢測微弱熒光信號的重要指標(biāo),一般以能檢測到單個微球上最少標(biāo)有FITC或PE熒光分子數(shù)目來表示,一般現(xiàn)在的FCM均可達(dá)到600個熒光分子。(二)儀器的分辨率分辨率是衡量儀器測量精度的指標(biāo)...[繼續(xù)閱讀]

    眾所周知,流式細(xì)胞儀是通過內(nèi)置的激光器發(fā)射的激光激發(fā)熒光染料,通過熒光將488nm或其他波長的光轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪徊ㄩL的光;并通過光電倍增管將光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?并由計(jì)算機(jī)統(tǒng)計(jì)處理變?yōu)榭勺x數(shù)據(jù)。在流式細(xì)胞儀上常用的熒光素有...[繼續(xù)閱讀]

    FCM對單細(xì)胞快速進(jìn)行各種參數(shù)分析必須以單細(xì)胞為基礎(chǔ),根據(jù)各種組織成分的特點(diǎn)可選擇不同的分散細(xì)胞方法,以期達(dá)到單細(xì)胞產(chǎn)額高、損傷少的目的。盡管標(biāo)本制備已形成了標(biāo)準(zhǔn)化的程序,但實(shí)際操作中總會出現(xiàn)這樣或那樣的問題。...[繼續(xù)閱讀]

    正常組織、瘤組織和淋巴結(jié)等活檢組織以及內(nèi)鏡(胃鏡、食管鏡等)取材標(biāo)本,由于材料較少,制備起來比較麻煩。但其制備方法與實(shí)體組織基本相似;(1)取材后立即放入盛少許PBS液的青霉素小瓶中;(2)另取一只小燒杯,杯口用300目尼龍網(wǎng)蓋...[繼續(xù)閱讀]

    石蠟包埋組織單細(xì)胞分散方法的建立,擴(kuò)大了流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用范圍。對大量臨床隨訪資料通過病理包埋組織的流式細(xì)胞術(shù)分析,可以重新得到深入研究和利用。現(xiàn)將常用的制備石蠟包埋組織單細(xì)胞方法介紹如下。(一)實(shí)驗(yàn)方法(1)把石...[繼續(xù)閱讀]

    血液是天然的單個細(xì)胞分散的細(xì)胞懸液,血細(xì)胞在生理狀態(tài)下呈分散的游離狀態(tài)。它是流式細(xì)胞分析的理想樣品。血液中的主要細(xì)胞成分為白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板;而其中白細(xì)胞主要成分又分為淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和粒細(xì)胞。但在血...[繼續(xù)閱讀]

    (一)制備方法(1)無菌抽取骨髓液0.5ml;(2)將骨髓標(biāo)本滴入含1000U/ml肝素抗凝劑的1mlPBS液中;(3)再加入PBS液稀釋至10ml;(4)用吸管吸取5ml稀釋骨髓液徐徐加入盛有4ml的人類淋巴細(xì)胞分離液液面之上;(5)在以上條件下,骨髓有核細(xì)胞分層在PBS-人類...[繼續(xù)閱讀]

    (一)培養(yǎng)細(xì)胞的特征一般細(xì)胞培養(yǎng)分為懸浮培養(yǎng)和貼壁培養(yǎng),由于細(xì)胞的增殖有可能形成大小不等的細(xì)胞團(tuán)塊或連接成片。如果兩個或多個細(xì)胞粘連在一塊或細(xì)胞碎片過多都將影響FCM結(jié)果,進(jìn)而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。所以,制備合格的培養(yǎng)細(xì)胞...[繼續(xù)閱讀]