在臨床工作中,可以收集到大量自然脫落細(xì)胞,這些細(xì)胞標(biāo)本經(jīng)過簡(jiǎn)單處理,便可成為較好的單細(xì)胞懸液供流式細(xì)胞術(shù)分析。主要包括脫落細(xì)胞、胸腹水細(xì)胞、尿液、內(nèi)鏡刷檢細(xì)胞等。(一)食管拉網(wǎng)細(xì)胞的單細(xì)胞懸液的制備(1)將食管拉網(wǎng)...[繼續(xù)閱讀]

    定量細(xì)胞熒光染色,要求細(xì)胞成分染色均勻,保證染色做到染料分子數(shù)與被染的某種參量成一定的量效關(guān)系。在流式定量分析中,掌握好熒光染色液的濃度非常重要。為了更好地說明這個(gè)問題,可以用下式表示:F=Q(I-εCL)式中:F表示熒光強(qiáng)...[繼續(xù)閱讀]

    (一)細(xì)胞破膜劑應(yīng)用的意義用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞DNA、內(nèi)抗原,如與細(xì)胞凋亡有關(guān)的P53蛋白、Bcl-2蛋白、及細(xì)胞內(nèi)因子IL-4、IFN-γ等,均需要首先使流動(dòng)的、完整的細(xì)胞膜產(chǎn)生可通透抗體的小孔,即所謂的破膜過程。破膜的好壞直接影響熒...[繼續(xù)閱讀]

    溶血,即裂解紅細(xì)胞是流式細(xì)胞術(shù)分析白細(xì)胞的先決條件。溶血不好,白細(xì)胞群不能很好分開。所以,溶血好壞直接影響檢測(cè)結(jié)果。為此,必須對(duì)溶紅細(xì)胞過程進(jìn)行全面了解并嚴(yán)格控制溶解紅細(xì)胞的條件。(一)溶解紅細(xì)胞的基本原理首先...[繼續(xù)閱讀]

    機(jī)體免疫狀態(tài)是衡量機(jī)體是否罹患疾病的重要指標(biāo),目前多采用流式細(xì)胞術(shù)來監(jiān)測(cè)機(jī)體的免疫狀態(tài),其中最重要的指標(biāo)是檢測(cè)T、B和NK淋巴細(xì)胞的水平。T細(xì)胞又主要包括T輔助細(xì)胞(Th)和T抑制細(xì)胞(Ts)細(xì)胞亞群。CD3細(xì)胞代表外周血中總的成...[繼續(xù)閱讀]

    (一)雙色分析方案CD45-FITC/CD14-PE;CD3-TC-CD4-PE-CD8-FITC;CD3-FITC/CD(16+56)-PE;CD19-TC;Cal-Lyse;ControlIgG2a-FPT。結(jié)果見表2-3-1。(二)三色分析方案表2-3-1雙色法檢測(cè)外周血T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞試劑組合管號(hào)FITCPE應(yīng)用12345CD45CD3CD3CD3CD3CD14CD19CD4CD8CD16和CD56光...[繼續(xù)閱讀]

    PI或EB熒光染色方法,目前市場(chǎng)已有試劑盒出售,十分方便;但也可以自行配制試劑。用PI綜合染液做細(xì)胞DNA含量“一步法”染色:①PI綜合染液的配制:生理鹽水129.6ml,PI10mg、RNase2mg、1.0%TritonX-1000.5ml、枸櫞酸鈉200mg、加蒸餾水至200ml,調(diào)pH7....[繼續(xù)閱讀]

    (一)DNA倍體分析的理論依據(jù)在生物細(xì)胞中,DNA含量是恒定的參量,DNA含量隨著細(xì)胞增殖周期各時(shí)相不同而發(fā)生變化。G0期細(xì)胞被認(rèn)為是不參與增殖周期循環(huán)的一群細(xì)胞,即為靜止細(xì)胞,其細(xì)胞為恒定的二倍體DNA含量(2C);G1期細(xì)胞具有增殖活...[繼續(xù)閱讀]

    半胱氨酸蛋白酶3(caspases-3)是細(xì)胞凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的ICE蛋白酶家族的重要成員,在細(xì)胞凋亡發(fā)生的早期被激活。ICE家族主要通過兩種途徑來引起細(xì)胞凋亡的發(fā)生:①細(xì)胞毒T細(xì)胞(CTL)活化后大量表達(dá)Fas配體(FasL),FasL和靶細(xì)胞表面的Fa...[繼續(xù)閱讀]

    正常細(xì)胞膜磷脂的分布是不對(duì)稱的,膜內(nèi)表面含有帶負(fù)電的磷脂(如磷脂酰絲氨酸,PS),而膜外表面含有占絕大多數(shù)的中性磷脂。在細(xì)胞凋亡早期,細(xì)胞表面發(fā)生變化,細(xì)胞膜內(nèi)部的磷脂酰絲氨酸(PS)遷移到細(xì)胞外層表面,巨噬細(xì)胞就是通過識(shí)...[繼續(xù)閱讀]