流式細(xì)胞儀(flowcytometer,FCM)是在光電子技術(shù)、激光技術(shù)、熒光化學(xué)、單克隆抗體技術(shù)及計(jì)算機(jī)技術(shù)等交叉融合的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種先進(jìn)的生物醫(yī)學(xué)儀器設(shè)備。流式細(xì)胞術(shù)(flowcytometry,FCM)就是利用流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞進(jìn)行快速、多參數(shù)...[繼續(xù)閱讀]

    待測(cè)標(biāo)本的細(xì)胞懸液,在流式細(xì)胞儀精細(xì)的液流和壓力控制下,受到鞘液的包裹和約束,細(xì)胞排成單列由流動(dòng)池噴嘴高速噴出,形成細(xì)胞液柱。當(dāng)細(xì)胞液柱通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)區(qū),細(xì)胞液柱中的細(xì)胞在入射的激光束照射下產(chǎn)生前向散射(f...[繼續(xù)閱讀]

    (一)前向散射(FSC)樣本流中的細(xì)胞在激光束的照射下會(huì)產(chǎn)生散射光,正對(duì)著激光方向的散射光信號(hào)在前向小角度進(jìn)行檢測(cè),稱為前向散射(圖1-1)。它的值反映細(xì)胞體積的大小。(二)側(cè)向散射(SSC)90°方向的光電倍增管接收到的散射光稱為側(cè)...[繼續(xù)閱讀]

    熒光信號(hào)是指熒光素分子受到激發(fā)后發(fā)出的熒光。在流式細(xì)胞分析中,經(jīng)過(guò)熒光抗體標(biāo)記的細(xì)胞通過(guò)激光照射檢測(cè)區(qū)時(shí),在激光照射下,熒光染料吸收能量發(fā)生能量躍遷,也就是熒光染料中的原子核周圍電子從基礎(chǔ)態(tài)軌道躍遷到激發(fā)態(tài)軌...[繼續(xù)閱讀]

    流式通道包括散射光通道和熒光通道。散射光通道包括前向散射光通道和側(cè)向散射光通道。熒光通道是指檢測(cè)熒光信號(hào)的通道。前向散射光通道和側(cè)向射光通道是分別接收前向散射(FSC)光和側(cè)向散射(SSC)光的通道,可以分別簡(jiǎn)稱為FS...[繼續(xù)閱讀]

    流式細(xì)胞術(shù)中使用圖形化的方式對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行顯示和分析,其中承載大量細(xì)胞參數(shù)的圖形稱為流式圖(圖1-4)。其中單參數(shù)分析的圖形表達(dá)方式為直方圖;對(duì)兩個(gè)以上參數(shù)進(jìn)行分析的圖形表達(dá)方式可以是散點(diǎn)圖、二維等高線圖與二維密度圖...[繼續(xù)閱讀]

    流式細(xì)胞分析中的熒光染色常需要兩種或兩種以上標(biāo)記不同熒光素的單克隆抗體或不同染料的熒光素進(jìn)行多色分析。兩種或兩種以上熒光素受激發(fā)后發(fā)出不同波長(zhǎng)的熒光,理論上可以通過(guò)分光鏡和濾光片等方式將不同波長(zhǎng)的熒光之間...[繼續(xù)閱讀]

    流式細(xì)胞分析的對(duì)象主要是細(xì)胞和微球。但是實(shí)際上流式細(xì)胞分析的標(biāo)本中可能或多或少含有細(xì)胞碎片或其他顆粒性物質(zhì),它們也會(huì)被流式細(xì)胞儀檢測(cè)到,從而影響目標(biāo)細(xì)胞或微球的分析結(jié)果。流式細(xì)胞術(shù)可以通過(guò)設(shè)定閾值的方法將細(xì)...[繼續(xù)閱讀]

    每一個(gè)流式通道都有自己特定的光電倍增管,而每一個(gè)光電倍增管的電壓都是分別調(diào)控的,因此流式細(xì)胞分析需要用到多少檢測(cè)通道,就需要相應(yīng)設(shè)定多少個(gè)光電倍增管的電壓。如FITC、PE兩種熒光抗體標(biāo)記細(xì)胞的流式分析中需要預(yù)先分...[繼續(xù)閱讀]

    前面已經(jīng)介紹光譜重疊與熒光補(bǔ)償?shù)母拍?。光譜重疊會(huì)導(dǎo)致不同熒光通道之間的信號(hào)干擾,流式細(xì)胞術(shù)通過(guò)調(diào)節(jié)各個(gè)熒光通道之間的補(bǔ)償將干擾信號(hào)減去,保證流式分析結(jié)果的正確。調(diào)節(jié)補(bǔ)償是流式細(xì)胞分析的一項(xiàng)基本要求。不同的流...[繼續(xù)閱讀]