層析是用于蛋白質(zhì)分離純化的重要技術(shù)手段。它是基于固定相(層析介質(zhì))對流動相(蛋白質(zhì)溶液)中各組分阻滯能力大小不同而實現(xiàn)對各組分的分離。按照蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)不同而實現(xiàn)分離的層析包括:(1) 根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷不同而分...[繼續(xù)閱讀]

    為了研究某一特定蛋白的功能,或是利用該特定蛋白研究其他基因的功能,需要將該蛋白在體外表達出來。將該蛋白的編碼DNA 序列擴增出來,然后應(yīng)用酶學的辦法將該目的片段和表達載體DNA 片段連接,組裝成一個新的DNA 分子,再用適當?shù)?..[繼續(xù)閱讀]

    蛋白質(zhì)的定性分析是指確定樣本中是否有蛋白質(zhì)存在,以及存在的是何種蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)定量分析是確定樣本中總蛋白含量或某一單一蛋白含量。蛋白質(zhì)是由許多氨基酸通過肽鍵連接構(gòu)成的生物大分子,氨基酸、肽鍵、蛋白質(zhì)的組成特...[繼續(xù)閱讀]

    蛋白質(zhì)相互作用及通過相互作用而形成的蛋白質(zhì)復(fù)合物是細胞行使各種基本功能的主要承擔者,幾乎所有重要的生命活動,包括DNA 復(fù)制與轉(zhuǎn)錄、蛋白質(zhì)合成與分泌、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和代謝等都離不開蛋白之間的相互作用。常用的蛋白質(zhì)相互...[繼續(xù)閱讀]

    激光掃描共聚焦顯微鏡(confocal laser scanning microscopy ,CLSM)是20世紀80年代中期在顯微分光光度計和流式細胞儀的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種以光學為基礎(chǔ),融機械、電子、計算機為一體的高精度現(xiàn)代化新型顯微測試儀器,它脫離了傳統(tǒng)光學顯...[繼續(xù)閱讀]

    基因是遺傳信息的載體,而生命活動、表觀形狀的體現(xiàn)等是由基因的編碼產(chǎn)物——蛋白質(zhì)所執(zhí)行。越來越多的證據(jù)表明,基因表達和蛋白質(zhì)豐度及蛋白質(zhì)功能之間的相關(guān)性不完全一致,為了在一個樣本中平行檢測多種蛋白表達及功能信...[繼續(xù)閱讀]

    DNA 重組質(zhì)粒是分子克隆的一類,而分子克隆和聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction ,PCR)是兩種廣泛用于復(fù)制特定DNA 序列的方法。DNA 重組系在體外將外源目的基因插入載體DNA ,載體一般來源于質(zhì)?；虿《?重組形成一個具有自我復(fù)制能力...[繼續(xù)閱讀]

    基因轉(zhuǎn)錄是指以DNA 的一條鏈為模板,按照堿基互補配對的原則,在RNA 聚合酶復(fù)合物的作用下合成RNA 的過程,是基因表達過程中的重要環(huán)節(jié)(彩圖4-2-1) 。基因的轉(zhuǎn)錄水平受到機體精細的調(diào)控,過程復(fù)雜,涉及多個生物學過程。機體重要生物...[繼續(xù)閱讀]

    人類基因組計劃的完成和人類單倍型計劃的實施,使得人類基因組中以單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism ,SNP)為主的多種分子遺傳標記不斷地被發(fā)現(xiàn)報道。隨著分子生物學和分子遺傳學檢測技術(shù)日新月異的發(fā)展,近年來的研究發(fā)...[繼續(xù)閱讀]

    RNA 干擾(RNA interfering ,RNAi)是指由與靶基因序列同源的雙鏈RNA (doublestranded RNA ,dsRNA)引發(fā)的廣泛存在于生物體內(nèi)的序列特異性基因轉(zhuǎn)錄后的沉默過程。其通過細胞中的核糖核酸酶Ⅲ 家族成員之一的dsRNA 特異性核酸酶Dicer 將dsRNA 裂解成由...[繼續(xù)閱讀]