顯微注射是指在顯微鏡下,通過毛細(xì)注射針,將外源基因或其它物質(zhì)導(dǎo)入生物細(xì)胞的過程。早期顯微注射僅限于將外源物質(zhì)注入體積較大的卵細(xì)胞或受精細(xì)胞,其中將基因?qū)胧芫巡⑹怪l(fā)育成個(gè)體的過程稱為轉(zhuǎn)基因動(dòng)物技術(shù)。儀器...[繼續(xù)閱讀]

    核基質(zhì)——中間纖維的整裝電鏡制樣技術(shù)細(xì)胞骨架與核骨架是近年來新發(fā)現(xiàn)的一種細(xì)胞內(nèi)特殊細(xì)胞器。大量的研究表明,細(xì)胞骨架與細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、分裂、分化等關(guān)系密切;而核骨架與細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制、RNA的轉(zhuǎn)錄,乃至基因表達(dá)調(diào)控等重要...[繼續(xù)閱讀]

    一、一般技術(shù)(一)液體配制1.PBS配方1:...[繼續(xù)閱讀]

    一、非酶分離細(xì)胞方法(一)機(jī)械分離法　適用于較柔軟的組織,如腦、肝、脾、淋巴結(jié)、胸腺、胚胎組織、腫瘤組織等。1.組織研磨法:操作方法:(1)取消毒的碟皿(直徑5～8cm或略大),放入少許Hanks液或PBS;(2)將采取的小塊組織先用PBS漂洗去...[繼續(xù)閱讀]

    肝臟灌流分離肝細(xì)胞可以獲得大量肝細(xì)胞,而且存活率高,分離所需時(shí)間短,是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肝細(xì)胞分離的較好方法。操作程序:1.大鼠或小鼠用乙醚或2%戊巴比妥(腹腔注射60mg/kg體重)麻醉,浸入75%酒精3～5秒,使全身毛皮浸濕,剝離皮膚,將動(dòng)物固...[繼續(xù)閱讀]

    細(xì)胞淘洗法(elutration)首先由P·E·Lindahl于1948年報(bào)道,他利用這種裝置分離了真核細(xì)胞、精子細(xì)胞、酵母細(xì)胞、艾氏腹水細(xì)胞等。直到1973年,Beckman公司生產(chǎn)了JE-6型離心轉(zhuǎn)頭后,這種分離系統(tǒng)才廣泛地被應(yīng)用。它適用于單個(gè)細(xì)胞懸液,也適...[繼續(xù)閱讀]

    由于細(xì)胞表面均帶有多少不等的電荷,因此在電場(chǎng)中就會(huì)向一定的方向泳動(dòng),泳動(dòng)的速度與電荷的多少相關(guān)。絕大多數(shù)的細(xì)胞在生理性pH條件下,其表面帶有負(fù)電荷。不同種類的細(xì)胞帶負(fù)電荷的密度不同,因此在電場(chǎng)中移動(dòng)的速度也不相...[繼續(xù)閱讀]

    一、什么是細(xì)胞通訊　　器官和組織的細(xì)胞與細(xì)胞之間存在的細(xì)胞膜通道連接結(jié)構(gòu),稱為間隙連接(gapjunctions)。間隙連接廣泛存在于動(dòng)物組織細(xì)胞中,是相鄰細(xì)胞間直接交流細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的信息分子或離子進(jìn)行通訊的途徑。間隙連接介導(dǎo)的...[繼續(xù)閱讀]

    一、基本原理間隙連接通道的內(nèi)徑約為1.5nm,只能允許離子和分子量小于或等于1000道爾頓的分子通過。信號(hào)分子和離子在細(xì)胞間流動(dòng)的方向受化學(xué)濃度級(jí)差的驅(qū)動(dòng)。據(jù)此,檢查細(xì)胞通訊的方法主要有以下3種,即電偶聯(lián)、細(xì)胞代謝協(xié)同和...[繼續(xù)閱讀]

    一、抗腫瘤藥物研究多數(shù)腫瘤細(xì)胞通訊減弱或消失,促進(jìn)間隙連接通訊的藥物,如cAMP、維甲酸、鈣調(diào)蛋白拮抗劑等能抑制腫瘤細(xì)胞增殖與其對(duì)細(xì)胞通訊的促進(jìn)或改善作用相關(guān)?？蓪⑺幬锎龠M(jìn)通訊缺陷的腫瘤細(xì)胞恢復(fù)連接通訊的作用,作...[繼續(xù)閱讀]