20世紀60年代初,人們發(fā)現(xiàn)了生物素和卵白素也稱抗生素蛋白,具有高度親和力,反應迅速,也是自然界中具有最強親和力的物質(zhì)之一。生物化學家利用這一特點進行某些提取和層析工作已有40年的歷史。20世紀70年代又發(fā)現(xiàn),生物素可以和...[繼續(xù)閱讀]
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20世紀60年代初,人們發(fā)現(xiàn)了生物素和卵白素也稱抗生素蛋白,具有高度親和力,反應迅速,也是自然界中具有最強親和力的物質(zhì)之一。生物化學家利用這一特點進行某些提取和層析工作已有40年的歷史。20世紀70年代又發(fā)現(xiàn),生物素可以和...[繼續(xù)閱讀]
免疫細胞化學的特異性染色指抗體只與相應的靶抗原決定簇反應,與其他抗原決定簇不起反應,因此組織切片內(nèi)只有含靶抗原的部位染色才顯陽性。理想的免疫組化染色應該只有特異性反應的染色,陽性產(chǎn)物反應強,背景清晰,因而兩者能...[繼續(xù)閱讀]
一、對照的準確設置免疫組化染色結(jié)果,有時存在一定的非特異性背景染色。這種染色不是特異性抗體、抗原反應,而是一種由多種原因引起的魚目混珠的假象。因此必須用對照的方法來證實組織內(nèi)顯示的反應產(chǎn)物,熒光或有色的產(chǎn)物...[繼續(xù)閱讀]
一、顯色底物免疫酶組織化學技術中,由于抗原抗體反應后所形成的復合物本身無色,無法直接觀察,因而需借助于某些化學基因的呈色作用,使其得以顯示,得以在顯微鏡下觀察。目前用于免疫酶染色的酶主要有辣根過氧化物酶、堿性磷...[繼續(xù)閱讀]
機體受到抗原刺激后,通過體液免疫應答,B淋巴細胞活化、增殖、分化為漿細胞,由漿細胞合成并分泌的僅與該抗原發(fā)生特異性反應的球蛋白,稱抗體(antibody)。由于無抗體活性的免疫球蛋白一般很少見,故人們常把抗體與免疫球蛋白等同...[繼續(xù)閱讀]
[1]王伯沄.病理學技術[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2000.[2]倪燦榮,馬大烈,戴益民.免疫組織化學實驗技術及應用[M].北京:化學工業(yè)出版社,2006.[3]倪燦榮.免疫組織化學實驗新技術及應用[M].北京:北京科學技術出社,1993.[4]SanoK,SekineJ,InokuchiT.En...[繼續(xù)閱讀]
一、免疫熒光技術的基本原理免疫熒光技術是根據(jù)抗原抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光素,制成熒光抗體,再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢測組織或細胞內(nèi)的相應抗原(或抗體)。在組織或細胞內(nèi)形成的抗原抗體...[繼續(xù)閱讀]
一、熒光色素能夠產(chǎn)生熒光并能作為染料的化合物稱為熒光色素,熒光色素必須具備吸收激發(fā)光的光能并發(fā)射熒光,具有吸收一定頻率光能的生色團和能產(chǎn)生一定光亮子的熒光團。吸收的光能轉(zhuǎn)變?yōu)闊晒獾陌俜謹?shù)稱為“熒光效率”。熒...[繼續(xù)閱讀]
一、標記方法(一)FITC標記抗體的方法當FITC在堿性溶液中與抗體蛋白反應時,主要是賴氨酸的E-氨基與熒光素的硫碳胺鍵(Thiocarbmide)結(jié)合,形成FITC-蛋白結(jié)合物,即熒光抗體或熒光結(jié)合物。一個IgG分子中有86個賴氨酸殘基,一般最多能結(jié)合...[繼續(xù)閱讀]
一、直接法這是最簡便、快速的方法,用已知特異性抗體與熒光素結(jié)合,制成特異性熒光抗體。直接用于細胞或組織抗原的檢查,此法特異性高,其缺點是一種熒光抗體只能檢查一種抗原,敏感性較差(圖5-11)。但非常實用,應用也廣泛,例如...[繼續(xù)閱讀]